| وصف | Oleoylethanolamide هو ناهض PPAR-α داخلي عالية التقارب ، والذي يلعب دورًا مهمًا في علاج السمنة وتصلب الشرايين. |
| الكتالوج ذات الصلة | |
| هدف | المستقلب الداخلي البشري PPAR-α |
| في المختبر | أوليليثانولاميد (OEA) ، يجند PPAR-α الداخلي ، يخفف من تليف الكبد الذي يستهدف الخلايا النجمية الكبدية. يمنع Oleoylethanolamide تفعيل خلايا الكبد الناتجة TGF-β1 (HSCS) في المختبر عبر PPAR-α. لتقييم تأثير Oleoylethanolamide على تنشيط HSCS ، يتم فحص مستويات التعبير عن α-SMA و Col1a في HSCs المحفزة TGF-β1 بواسطة QPCR. يتم إحداث مستويات مرنا من α-SMA و COL1A بشكل ملحوظ في مجموعة خلايا CFSC مع تحفيز TGF-β1 (5 نانوغرام/مل) لمدة 48 ساعة ، بينما يتم قمع مستويات مرنا عند علاجها مع أوليليثانولاميد بطريقة تعتمد على الجرعة. تُظهر نتائج المناعة المناعية ونتائج لطخة غربية أن جرعة علاج أوليليثانولاميد تمنع تعبير البروتين من α-SMA ، علامة تنشيط HSC. يتم حظر الآثار المثبطة للأوليليليثانولاميد على تنشيط HSCS بالكامل بواسطة مضادات PPAR-α MK886 (10 ميكرومتر). علاوة على ذلك ، يتم تنظيم مستويات التعبير مرنا والبروتين من PPAR-α مع تحفيز TGF-β1 ، في حين أن علاج أوليليثانولاميد يعيد هذه التغيرات بطريقة تعتمد على الجرعة. بالإضافة إلى ذلك ، يتم تنظيم فسفرة SMAD 2/3 في وجود تحفيز TGF-β1 ، بما يتوافق مع التأثيرات المرصودة على تنشيط HSC ، في حين أن الأوليثانولاميد (10 ميكرومتر) يقلل من الفسفرة من SMAD2/3 في محاكاة CFSC مع TGF-β1 [1]. |
| في الجسم الحي | يمكن أن يقمع Oleoylethanolamide (OEA) بشكل كبير من السيتوكينات المؤيدة للخلايا TGF-β1 سلبًا في مسار إشارات TGF-β1 (α-SMA ، الكاتبة 1A ، والكولاجين 3A) في نماذج الفئران من التليف الكبدي. العلاج مع الأوليليليثانولاميد (5 ملغ/كغ/يوم ، الحقن داخل الصفاق ، على سبيل المثال) يخفف بشكل كبير من تقدم تليف الكبد في كلا النموذجين الحيوانية التجريبية عن طريق منع تنشيط الخلايا النجمية الكبدية (HSCs) [1]. |
| فحص الخلايا | يتم الحصول على خطوط خلايا CFSC ، HSC لأول مرة من كبد الفئران التليف الكبدي ، ولها نمط ظاهري مماثل لتلك الخاصة بـ HSCs الأولية في وقت مبكر. تتم تربيتها في خلايا CFSC في متوسطة النسر المعدلة في Dulbecco (DMEM) مع مصل الأبقار الجنينية بنسبة 10 ٪ (FBS) و 1 ٪ من البنسلين/الستربتومايسين. جميع الخلايا مثقفة في لوحات ثقافة 6 بئر أقل من 37 درجة مئوية و 5 ٪ ثاني أكسيد الكربون في حاضنة. يتم استبدال الوسيلة كل يومين ، ويتم حصاد الخلايا وتخفيفها بنسبة 1: 3 مرتين في الأسبوع. في التجارب ، يتم معالجة HSCs مع التركيز التجريبي للأوليليثانولاميد (30 ميكرومتر ، 10 ميكرومتر ، 3 ميكرومتر) قبل التحفيز مع 5 نانوغرام/مل TGF-β1. يتم تحليل مستويات التعبير مرنا من α-SMA (A) و Col1a (B) بواسطة PCR في الوقت الحقيقي [1]. |
| مسؤول الحيوانات | يتم الحفاظ على الفئران [1] الفئران SV/129 وفئران خروج المغلوب PPAR-α في غرفة مع درجة حرارة خاضعة للرقابة (21-23 درجة مئوية) ، والرطوبة (55-60 ٪) والإضاءة (12 ساعة من الدورات الخفيفة/الداكنة) ومعطى ماء إعلان. يتم تقسيم الفئران بشكل عشوائي لتجارب ميثيونين التي تعاني من نقص الكولين (MCD) و Thioacetamide (TAA). في تجربة التغذية MCD-DIET ، يتم تقسيم كل من الفئران من النوع البري SV /129 و PPAR-α بالضربة القاضية إلى ثلاث مجموعات (ن = 8 /مجموعة): (1) تتلقى مجموعة التحكم النظام الغذائي الطبيعي ؛ (ii) تغذيها نظام MCD وحقنها مع السيارة (5 ٪ Tween-80+5 ٪ PEG400+90 ٪ ملحي ، 5 مل/كغ/يوم ، 8 أسابيع ، الحقن داخل الصفاق ، على سبيل المثال) ؛ (3) تم تغذيته مع حمية MCD جنبا إلى جنب مع إدارة أوليليثانولاميد (5 ملغ/كغ/يوم ؛ 8 أسابيع ، على سبيل المثال). في مجموعة أخرى من التجربة ، يتم إعطاء جميع الفئران من النوع البري والفئران بالضربة القاضية PPAR-α نظامًا غذائيًا قياسيًا ، ويتم فصلهم بشكل عشوائي إلى ثلاث مجموعات: لم يتم إدارة المجموعة الضابطة TAA أو Oleoylethanolamide ولكن يتم حقنها بالمحلول الملحي ؛ يتم حقن مجموعة TAA مع TAA (160 ملغ/كغ ، ثلاث مرات في الأسبوع ، 6 أسابيع ، مذاب في ملحي ، على سبيل المثال) بالإضافة إلى السيارة المقابلة ؛ يتم حقن مجموعة Oleoylethanolamide مع Taa و Oleoylethanolamide (5 ملغ/كغ/يوم ؛ 6 أسابيع ، على سبيل المثال) [1]. |
| مراجع | [1]. Chen L ، وآخرون. أوليليثانولاميد ، يجند PPAR-α الداخلي ، يخفف من تليف الكبد يستهدف الخلايا النجمية الكبدية. oncotarget. 2015 ديسمبر 15 ؛ 6 (40): 42530-40 |
العربية
GHS07
